生物分析中蛋白质、多肽及寡聚核苷酸样品制备、除盐耗材介绍

更新时间：2012-06-04

浏览次数：2076

LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是zui常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS（磷酸盐缓冲溶液）。这些盐溶液，能和蛋白质形成加和离子，使数据解析更加复杂，同时，这些盐类也抑制了ESI-MS分析时的离子化效率。因此，质谱分析之前，蛋白质的非挥发性盐类的去除是重要的一步。沃特世公司的MassPREPTM 在线脱盐小柱（2.1X10 mm，Part number186004032）为客户提供了简单易行，快速（小于5分钟的液相梯度，如图1），及重现性高的有效脱盐方法[1]。并成功应用于12KDa~150KDa分子量范围的完整蛋白质的脱盐LC-MS分析（如图2）展示了这种除盐柱用在细胞色素 C（分子量约12KDa），牛血清白蛋白BSA（分子量约62KDa），和IgG（分子量约150KDa）的除盐效果，而且柱容量可高达10微克[2,3,4]。